Berufspraktikum

PROJEKT

Mikrofluidische Biochips für automatisierte Zellmarkierung

FAKTEN

Kurzbeschreibung

Zurzeit ist die Analyse der zeitlich aufgelösten räumlichen Organisation von Zellbestandteilen hauptsächlich auf die Untersuchung von individuellen Zellen und auf wenige Proteine beschränkt. Die Absicht dieses Projekts ist, den Prozess der zeitaufgelösten Messung zu vereinfachen und die Machbarkeit einer Hochdurchsatz-Analyse am Modell-Organismus Hefe zu demonstrieren. Dies wird durch einen hohen Grad an Parallelisierung und Automation in der Mikroskopie unter Verwendung von miniaturisierten, nanolitergroßen Durchflusskammern innerhalb eines speziellen Biochips erreicht.Kernstück des Projekts ist die Analyse des Fettstoffwechsels in der Hefezelle. Es ist von besonderem Interesse zu verstehen, wie Fett abgelagert bzw. abgebaut wird, und wie sich die Gestalt und Größe der dabei entstehenden Strukturen (Lipidtröpfchen) verändert. Zu diesem Zweck werden Hefe- Mutanten mit Defekten in der Fettablagerung und im Fettabbau verwendet, um den Einfluss der Protein-Funktionsstörung auf den Lipid-Stoffwechsel zu studieren. Konkrete Aufgaben: Biochip Herstellung auf Basis der Multilayer Soft Lithographie, Hefekulturen anlegen, Entwicklung technischer Methoden zur zeitlichen und räumlichen Darstellung der Fettsäurenaufnahme und des Fettsäurentransports innerhalb des Hefeorganismus auf Basis der Mikrofluidität (Zellmanipulation, FM), High Density Yeast Array: Für die Anwendung in einem Hochdurchsatz Screen soll ein Array von 400 Hefemutanten mit hoher Dichte erzeugt werden, welcher im Speziellen die Darstellung der Morphologie der Lipidtröpfchen ermöglichen soll.